一种蛋白质短肽螯合钙的制备方法

摘要

本发明提高一种蛋白质短肽螯合钙的制备方法。所述方法为：将原料蛋白与水混合细化处理并杀菌后，加入蛋白水解酶进行第一次水解，将第一次水解后分离的液体部分采用截留分子量为1000～6000Da超滤膜进行超滤，并将超滤膜非透过的大分子肽液和第一次水解分离的固相部分混合后加入蛋白水解酶进行第二次水解，并将两次水解超滤后的小分子低聚肽液经纯化后加入氢氧化钙或氯化钙螯合，完毕后定量的碳酸钠在pH为中性时完全反应，过滤除去沉淀，再依次经过纳滤膜脱盐、杀菌、浓缩、干燥后得到蛋白质短肽螯合钙产品。本发明大大提高了蛋白质短肽的得率和原料蛋白的利用率，降低生产成本，所得到的蛋白质短肽螯合钙产品质量好，生产安全性高。

主权项

一种蛋白质短肽螯合钙的制备方法，其特征在于具体步骤如下：(1)将原料蛋白经过清洗、破碎后与水按重量比1:5～20混合，并将混合物送入胶体磨微细化处理使原料蛋白充分分散均匀形成蛋白质浓度为2％～10％原料液，并对其进行杀菌后加入蛋白水解酶进行第一次水解，第一次水解的条件为：温度30～60℃，pH2～10，时间1.0～6小时，蛋白水解酶与原料蛋白的质量比为1％～10％；(2)将步骤(1)中第一次水解后的水解液经过离心、过滤后分离出未水解的固相部分和水解液液相部分，并将其分别收集起来；然后将收集的水解液液相部分采用截留分子量为1000～6000Da超滤膜进行超滤，将超滤膜非透过的大分子肽液和透过的小分子低聚肽液分别收集起来；(3)将步骤(2)中第一次水解后收集的未水解的固相部分和超滤后收集的非透过的大分子肽液均匀混合形成第二次水解原料液，并加水控制第二次水解原料液中蛋白质浓度在1％～10％之间，然后加入蛋白水解酶进行第二次水解，第二次水解的条件为：温度30～60℃，pH2‑10，时间1～5小时，蛋白水解酶与二次水解原料液中蛋白质的质量比为1％～10％；(4)将步骤(3)中第二次水解后的水解液经过离心、过滤后采用截留分子量为1000～6000Da的超滤膜超滤，将超滤膜透过的小分子低聚肽液收集起来并与步骤(2)中第一次水解液超滤后的透过的小分子低聚肽液一起依次经过纯化，得到分子量小的蛋白质短肽水解液；(5)在步骤(4)中得到的蛋白质短肽水解液加入氢氧化钙或氯化钙在温度为20‑70℃、pH4.0‑9.0的条件下螯合20‑60min；螯合时使用的可溶性钙原料为氯化钙时，氯化钙与螯合液中蛋白质短肽的质量比为1:2；螯合中使用的可溶性钙原料为氢氧化钙时，氢氧化钙与蛋白质短肽的质量比为1:1‑1:2，完全反应后，并用浓度在1‑3mol/L的盐酸将反应液的pH调为中性；(6)测量出步骤(5)中螯合反应完毕后的螯合液中剩余游离钙离子的浓度，根据螯合液中剩余游离钙离子的浓度加入与螯合液中剩余的游离钙离子完全反应量的碳酸钠，在室温下充分搅拌5‑15分钟，使碳酸钠与氯化钙或氢氧化钙充分反应形成碳酸钙沉淀，并过滤去除碳酸钙沉淀，之后调整反应完毕的螯合液的pH呈中性；(7)将步骤(6)中去除碳酸钙沉淀沉淀且pH为中性的螯合液依次采用纳滤膜脱盐、杀菌、浓缩、干燥后得到蛋白质短肽螯合钙产品。