一种PEG修饰的重组精氨酸脱亚胺酶及其制备方法和应用

摘要

一种PEG修饰的重组精氨酸脱亚胺酶及其制备方法和应用，属于医药生物工程技术领域。本发明采用PEG修饰ADI，得到的ADI-PEG在体外和小鼠血浆中的稳定性得到明显提高。药代动力学/药效学研究表明：与修饰前的游离ADI相比，ADI-PEG在小鼠体内半衰期提高11倍以上；单次注射5UADI-PEG可降低并维持血浆中精氨酸浓度在极限水平5天以上，而未修饰的ADI仅能维持1天；对H₂₂肝癌模型小鼠进行治疗，在15天的疗程后，ADI-PEG（15U）治疗组对癌细胞的抑制率达到95.02%，与使用5-氟尿嘧啶治疗的阳性对照组（抑制率98.34%）接近。本发明的PEG修饰酶ADI-PEG具有较高的体内半衰期和较低的免疫原性，是一种优良的治疗或抑制肿瘤的药物。

主权项

一种PEG修饰的重组精氨酸脱亚胺酶，其特征在于：采用PEG修饰剂修饰大肠杆菌中重组表达的精氨酸脱亚胺酶ADI突变株，得到PEG修饰的重组精氨酸脱亚胺酶ADI‑PEG；其中ADI突变株M314的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；ADI突变株M13的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；ADI突变株M13‑1的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；ADI突变株M13‑2的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示；ADI突变株M13‑3的氨基酸序列如SEQ ID No.5所示；ADI的基因全长1,254bp，编码417个氨基酸，单个ADI亚基的分子量为46.5 kDa，重组精氨酸脱亚胺酶由2个或4个相同的ADI亚基组成。