发明名称 |
间日疟原虫醛缩酶蛋白单克隆抗体的制备方法 |
摘要 |
本发明公开了一种间日疟醛缩酶(aldolase)蛋白单克隆抗体的制备方法,该抗体是针对以aldolase蛋白为靶抗原,选择A、B、C三个优势抗原表位,通过柔性片段连接A、B、C三个优势抗原表位,形成重组子D,并在其上下游分别添加BamHI和XhoI限制性内切酶酶切位点,双酶切后插入载体PET-28a(+)载体中,构建重组蛋白D表达载体,利用大肠杆菌BL21表达重组蛋白D,免疫Balb/c小鼠,取其脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选得到10株稳定分泌aldolase蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明所得单克隆抗体能特异性识别间日疟原虫aldolase蛋白,可用于间日疟感染的特异性检测,特异性高,反应灵敏,实验成本低,适合高通量快速检测。 |
申请公布号 |
CN102690351B |
申请公布日期 |
2014.07.16 |
申请号 |
CN201210165773.6 |
申请日期 |
2012.05.25 |
申请人 |
杭州傲锐生物医药科技有限公司 |
发明人 |
陈东;张海燕;庞醒华 |
分类号 |
C07K16/40(2006.01)I |
主分类号 |
C07K16/40(2006.01)I |
代理机构 |
浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 |
代理人 |
黎双华;徐关寿 |
主权项 |
编码间日疟原虫醛缩酶蛋白的抗原表位重组核酸序列,其特征在于,所述核酸序列是由柔性片段GGCAGCGGCAGCGGC将间日疟原虫醛缩酶蛋白的抗原表位A、B、C的编码核酸序列相连接所得到的重组子D;其中,抗原表位A的编码核酸序列为:GAGGGAATCATTCCAGGAATTAAAGTTGAC AAAGGATTGGTTACCATCCCATGCACTGATGATGAGAAGTCCACCCAGGGATTAGATGGTCTAGCTGAGAGGTGTAAAGAATATTACAAAGCTGGTGCAAGGTTTGCAAAATGGAGAGCT;抗原表位B的编码核酸序列为:ATTGGTTTTCTCACAGTGAGAACTTTAAGTA GGACAGTGCCACCATCCTTACCAGGAGTTGTATTCTTATCTGGAGGTCAATCTGAAGAAGAAGCATCTGTCAATTTGAATTCCATCAATGCGTTAGGCCCACACCCATGGGCGTTGACC;抗原表位C的编码核酸序列为:AACTCCTTGGCGACTTATGGAAAGTACAAGG GAGGTGCAGGCGGAGCCGATGCAGGAGCATCCCTT;重组子D的编码核酸序列为:GAGGGAATCATTCCAGGAATTAAAGTTGAC AAAGGATTGGTTACCATCCCATGCACTGATGATGAGAAGTCCACCCAGGGATTAGATGGTCTAGCTGAGAGGTGTAAAGAATATTACAAAGCTGGTGCAAGGTTTGCAAAATGGAGAGCTGGCAGCGGCAGCGGCATTGGTTTTCTCACAGTGAGAACTTTAAGTAGGACAGTGCCACCATCCTTACCAGGAGTTGTATTCTTATCTGGAGGTCAATCTGAAGAAGAAGCATCTGTCAATTTGAATTCCATCAATGCGTTAGGCCCACACCCATGGGCGTTGACCGGCAGCGGCAGCGGCAACTCCTTGGCGACTTATGGAAAGTACAAGGGAGGTGCAGGCGGAGCCGATGCAGGAGCATCCCTT。 |
地址 |
311121 浙江省杭州市余杭区文一西路1500号1号楼209室 |