大肠直肠癌相关基因K-ras基因突变检测方法和相关检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种大肠直肠癌相关基因K-ras基因突变检测方法，包括步骤：a.提取肿瘤组织的基因组DNA；b.根据K-ras基因的包含第13号密码子的核苷酸序列设计一对PCR引物对，并设计一条与第13号密码子的突变核苷酸序列匹配的TaqMan MGB荧光探针，对基因组DNA进行荧光定量PCR；c.根据荧光定量PCR中收集的荧光信号而形成的实时扩增曲线，与阴性对照和阳性对照的结果进行比较和分析，从而鉴定基因组DNA中是否发生突变。还提供了相关检测试剂盒。本发明的大肠直肠癌相关基因K-ras基因突变检测方法设计巧妙，操作简单，可以筛检出可能对标靶药物有效的病人族群，检测结果准确可靠，从而可作为医师用药的参考依据，可指引医师与病人是否适合使用标靶治疗，适于大规模推广应用。

主权项

一种大肠直肠癌相关基因K‑ras基因突变检测方法，其特征在于，包括步骤：a.提取肿瘤组织的基因组DNA；b.根据K‑ras基因的包含第13号密码子的核苷酸序列设计一对PCR引物对，并设计一条与所述第13号密码子的突变核苷酸序列匹配的TaqMan MGB荧光探针，对所述基因组DNA进行荧光定量PCR；c.同时以含有所述的K‑ras基因的包含第13号密码子的核苷酸序列的阴性对照以及含有所述的K‑ras基因的包含第13号密码子的核苷酸序列且所述第13号密码子为所述突变核苷酸序列的阳性对照为模板，采用所述PCR引物对和所述TaqMan MGB荧光探针进行荧光定量PCR；d.将对所述基因组DNA进行的所述荧光定量PCR中收集的荧光信号而形成的实时扩增曲线与对所述阴性对照和所述阳性对照进行的所述荧光定量PCR中收集的荧光信号而形成的实时扩增曲线分别进行比较分析，从而鉴定所述基因组DNA中是否发生突变。