发明名称 一种操纵磁珠分离目标分子的方法
摘要 本发明公开了一种操纵磁珠分离目标分子的方法。该方法包括如下步骤:(1)结合:将磁珠、含有目标分子的溶液和结合缓冲液置于容器中混合,磁珠与目标分子结合形成复合物;去除杂质,保留复合物在所述容器中;(2)洗涤:向所述容器中加入洗涤缓冲液,使洗涤缓冲液与所述复合物混合,去除杂质,保留复合物在所述容器中;(3)洗脱:向所述容器中加入洗脱缓冲液,使洗脱缓冲液与所述复合物混合;再将所述容器脱离磁场,孵育以使所述磁珠与所述目标分子分离,收集目标分子。实验证明,本发明方法的得率高于传统抽吸方式的得率,并且离心管之间的一致性优于传统抽吸方式。因此,本发明方法在生物分子的分离和纯化领域将有广阔的应用前景。
申请公布号 CN102586225B 申请公布日期 2014.07.09
申请号 CN201110007882.0 申请日期 2011.01.14
申请人 博奥生物集团有限公司;清华大学 发明人 李航;项光新;周晶琳;谢秉霖;王小龙;王东
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07H1/06(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种利用磁珠将目标分子从溶液中分离的方法,包括如下步骤:(1)结合:将磁珠、含有目标分子的溶液和结合缓冲液置于容器中混合,将所述容器置于磁场的磁力范围中且使所述容器中的磁珠所受磁场力的方向和/或大小处于连续变化状态,以使所述容器中的所有物质相互间充分接触,磁珠与目标分子结合形成复合物;去除杂质,保留复合物在所述容器中;(2)洗涤:向所述容器中加入洗涤缓冲液,使洗涤缓冲液与所述复合物混合,将所述容器置于磁场的磁力范围中且使所述容器中的磁珠所受磁场力的方向和/或大小处于连续变化状态,以使所述容器中的所有物质相互间充分接触;去除杂质,保留复合物在所述容器中;(3)洗脱:向所述容器中加入洗脱缓冲液,使洗脱缓冲液与所述复合物混合,将所述容器置于磁场的磁力范围中且使所述容器中的磁珠所受磁场力的方向和/或大小处于连续变化状态,以使所述容器中的所有物质相互间充分接触;再将所述容器脱离磁场,孵育,以使所述磁珠与所述目标分子分离,收集目标分子;所述步骤(1)、(2)或(3)中,所述使磁珠所受磁场力的方向和/或大小处于连续变化状态的方法为使所述容器与所述磁场相对运动,其中产生磁场的磁铁是永磁铁;所述使所述容器与所述磁场相对运动的方法为所述容器在相对的两排磁铁之间做运动;所述容器为由若干个单独的管连接而成的排管,且所述排管呈一条直线;所述排管中各单独的管在同一时刻所受磁场力均一致;使所述排管中各单独的管在同一时刻所受磁场力均一致的方法为:每排磁铁均由若干个长方体状永磁铁依次连接而成,永磁铁连接方向呈直线且垂直于永磁铁自身的N极与S极连线方向,相邻的两个永磁铁的磁极方向相反;两排磁铁之间相对的两个永磁铁边缘连线呈矩形或正方形,且相对的两个永磁铁的磁极相同;排管与两排磁铁均保持平行,每个长方体状永磁铁沿其自身N极与S极连线方向的切面的宽度等于每个单管沿磁铁的N极与S极连线方向的切面的最宽处的宽度;且排管在两排磁铁的非边缘效应区域运动,所述边缘效应是每排磁铁的两端产生的边缘效应;所述1)、2)或3)中,所述运动为匀速圆周运动,是排管沿两排磁铁连线的水平面做匀速圆周运动;所述匀速圆周运动的速度为15rpm‑30rpm;所述目标分子为DNA、RNA、碳水化合物或蛋白质。
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