筛选钙激活氯离子通道抑制剂的细胞模型及筛选方法

摘要

本发明提供了一种筛选钙激活氯离子通道抑制剂的细胞模型及筛选方法，依次包括如下步骤：（1）构建Anoctamin1或Anocatmin2以及YFP-H148Q/I152L的真核表达载体；（2）将上述两种载体分别稳定转染入FRT细胞中，使FRT细胞共表达YFP-H148Q/I152L和Anoctamin1或Anocatmin2两种蛋白，经过多次有限稀释，获取FRT细胞模型；（3）将FRT细胞模型传代到黑壁透明底的黑壁微孔板中；（4）将待测小分子化合物加入黑壁微孔板中，孵育后加入使细胞内钙离子浓度升高的试剂和高浓度碘离子，通过检测相对荧光强度的变化，可筛选钙激活氯离子通道抑制剂。

主权项

一种筛选钙激活氯离子通道抑制剂细胞模型，其特征在于是一种共表达Anoctamin1或Anocatmin2和YFP‑H148Q/I152L两种蛋白的FRT细胞，Anoctamin1或Anocatmin2和YFP‑H148Q/I152L两种蛋白分别位于两个不同的真核表达载体，两种真核表达载体的真核抗性不同。