痕量RNA实时动态检测方法

摘要

本发明公开了一种痕量RNA实时动态检测方法，包括以下步骤：A1、首先进行DNA探针在芯片上的包被；A2、然后将待检痕量RNA与预先包被的DNA探针杂交，再加入DSN酶以降解杂交双链中的DNA，使RNA游离出来与DNA探针杂交，进而RNA-DNA复合物中的DNA继续被DSN降解，再次使RNA游离出来，重复上述过程，可以使体系中所有RNA-DNA复合物中的DNA均可被DSN酶降解。由于芯片上包被的DNA探针的量与SPR角度值成正相关，随着芯片上的DNA探针被逐渐酶切，导致其SPR角度值逐渐改变，通过该SPR角度值的变化对靶分子RNA进行快速定量实时检测。

主权项

一种痕量RNA实时检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A1、首先进行DNA探针在芯片上的包被；包括如下方法：石墨烯系统，纯金膜‑巯基系统，短链羧化物‑氨基系统(如常用的链酶亲和素‑生物素)；A2、然后将待检痕量RNA与预先包被的DNA探针杂交，再加入DSN酶以降解杂交双链中的DNA，使RNA游离出来与DNA探针杂交，进而RNA‑DNA复合物中的DNA继续被DSN降解，再次使RNA游离出来，重复上述过程，可以使体系中所有RNA‑DNA复合物中的DNA均可被DSN酶降解；A3、由于芯片上包被的DNA探针的量与SPR角度值成正相关，随着芯片上的DNA探针被逐渐酶切，导致其SPR角度值逐渐改变，利用表面等离子体共振（SPR）平台，可观测每个时刻SPR角度值的变化，其反映了检测RNA每个时刻的情况，通过该SPR角度值的变化可对靶分子RNA进行快速定量实时检测；本方法可根据酶切完全时间来定量RNA，或者确定某一时刻根据相应的SPR角度值来定量RNA。