一种新型T载体及其应用方法

摘要

将待克隆的DNA片段成功插入载体DNA，是筛选目标克隆，进而测定基因序列、分析基因结构与功能、进行基因重组表达等研究工作的首要步骤。本发明的新型载体pHsh-T具有以下特征：（1）同时具有T载体易于克隆和pHsh载体高效表达的功能；（2）具有双向基因表达元件，使正、反向连接的外源基因都得到有效表达，可用于基因文库的构建和活性筛选；（3）质粒分子小，是基因容量大、转化率高、易于进行原位基因改造的表达型T载体。用本发明的载体进行PCR产物的克隆、基因文库的构建和筛选，以及基因的超量表达，可以简化操作步骤、节约材料和时间；提高试验的准确性和成功率；加快研究进程以期获得更多科技成果。

主权项

一种新型表达型T载体，其基本特征在于在两个末端TA连接位点的上游各有1个强启动子及相应的基因表达元件（含转录起始位点、核糖体结合位点和下游的转录终止子），使正向和反向插入的外源基因都能得到有效表达。