胚胎肺体外培养方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及哺乳动物的胚胎肺的体外器官培养方法，特别是小鼠胚胎期肺的离体器官培养。本发明要解决的技术问题主要是现有培养方法需要特殊材料和占用空间大的缺陷。本发明技术方案是胚胎肺的体外器官培养方法，包括以下步骤：a、在多孔培养板的培养孔中放入尺寸与之适配的承载片，在培养孔底部构建出培养空间；b、将取得的哺乳动物胚胎肺或放置于承载片上，加入培养基，使肺处于培养基和空气的交界处；c、37℃培养箱中培养，然后每1到2天进行培养基换液。使用本发明方法能大量低成本地获得稳定发育且便于后继操作的体外培养肺器官，还能满足大规模药物筛选的需求。

主权项

哺乳动物胚胎肺的体外器官培养方法，其特征在于包括以下步骤：a、在多孔培养板的培养孔中放入尺寸与之适配的承载片，在培养孔底部构建出培养空间，所述承载片为透明玻璃圆片；b、将取得的哺乳动物胚胎肺放置于承载片上，加入培养基，使胚胎肺处于培养基和空气的液‑气交界面；所述的哺乳动物为小鼠；c、36℃～38℃培养箱中培养,然后每1到2天进行培养基换液；步骤c中所述的培养基采用半量递增的方式换液，即每次换液时保留上次培养基体积的一半在原培养孔中，然后将比上次培养基体积的一半按体积分数还多增加4%‑16%的新鲜培养基加入培养孔。