| 摘要 |
Un método que comprende: a) proporcionar i. un sustrato de ligamiento que comprende una secuencia de ácido nucleico diana que comprende al menos un primer dominio diana y un segundo dominio diana, en el que el ácido nucleico diana es una muestra bruta; ii. una primera sonda de ligamiento; y iii. una segunda sonda de ligamiento, en el que la primera sonda de ligamiento comprende un primer dominio de sonda sustancialmente complementario del primer dominio de diana y un resto de ligamiento 5'; en el que la segunda sonda de ligamiento comprende un segundo dominio de sonda sustancialmente complementario del segundo dominio de diana y un resto de ligamiento 3'; y en el que una o ambas de las sondas contienen una secuencia espaciadora variable con longitudes diferentes para cada secuencia de ácido nucleico diana; b) ligar la primera y segunda sondas de ligamiento en ausencia de enzima ligasa añadida exógenamente, formando un producto de ligamiento; en el que el producto de ligamiento tiene una longitud específica de diana que surge de la secuencia espaciadora variable, en el que el ligamiento ocurre en presencia de proteinasa K; c) amplificar el producto de ligamiento; y d) detectar el producto de ligamiento. |
