一种检测精子DNA碎片的方法及装置

摘要

一种检测精子DNA碎片的方法：1)调整精子浓度；2)将低熔点凝胶完全融化，平衡待用；3)将精子与该凝胶按适当比例混合；4)吸取得到的悬液至包被有高熔点凝胶的固相上，加盖盖片后置2～8℃使其凝固；5)移去盖片，在低于低熔点凝胶熔点的温度条件下，将包被固相水平浸入变性液中反应；6)将包被固相移入溶解液中，在低于低熔点凝胶熔点的温度条件下反应；7)洗涤包被固相；8)用从低至高的乙醇浓度顺序连续脱水，空气中干燥；9)染色；10)显微镜下计数精子DNA碎片的发生率。一种检测精子DNA碎片的装置，包括包被固相、低熔点凝胶水溶液、变性液、溶解液和洗涤液。本发明突出的技术效果：结果易于判定，操作简单，易于临床推广应用。

主权项

一种检测精子DNA碎片的装置，其特征在于，它包括：（1）包被固相：在载片或容器上包被有高熔点凝胶的固相；所述高熔点凝胶的熔点为40～100℃;（2）固封于密封管内的凝胶；其内的凝胶为低熔点凝胶，其熔点为25～60℃；（3）变性液：用来使精子变性以产生单链DNA的酸性水溶液；（4）溶解液：用来溶解去除精子核蛋白的含巯基试剂的三羟甲基氨基甲烷缓冲液；（5）用来指示反应后精子DNA碎片化状况的染色液;所述凝胶是聚丙烯酰胺凝胶或聚乙烯醇型凝胶或琼脂或琼脂糖或琼脂糖衍生物或葡聚糖凝胶或葡聚糖衍生物凝胶；所述溶解液pH值为7.0～9.0，其组分包括：巯基试剂的浓度含量为0.01～2.8摩尔/升、离子去垢剂的重量含量为0.05～1.5%，非离子去垢剂的体积含量为0.01～3.5%；所述巯基试剂是半胱氨酸、二硫赤藓糖醇、2‑巯基乙醇、二硫苏糖醇、谷胱甘肽、2,3‑二巯基丙醇中的一种或几种的混合；所述离子去垢剂是3‑[(3‑胆烷酰胺丙基)‑二甲铵]‑1‑丙磺酸盐、3‑[(3‑胆烷酰胺丙基)‑二甲铵]‑2‑羟‑1‑丙磺酸盐、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸钠、溴化十六烷基吡啶、十六烷基三甲基溴化铵、Zwittergent中的一种或几种的混合；所述非离子去垢剂是Tween‑20、Tween‑60、Tween‑80、Brij35、Brij56、Brij58、TritonX‑100、TritonX‑114、NonidetP40中的一种或几种的混合。