一种海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂的制备方法，其包括芽孢杆菌剂与麦饭石按1:1~4的质量比混合，所述芽孢杆菌剂的制备过程包括以下步骤：增菌、洗涤后收集菌体；再加入大豆粉混合制得；利用本发明实施例所述方法配制的海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂，适用于海参的育苗池和养成池；处理过程简单，耗时少；制备成本低于传统方法，本发明粉剂保存时间长，无污染。

主权项

一种海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）增菌：从芽孢杆菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到芽孢杆菌培养基中，30~35℃条件下，100～200rpm振荡培养12h后，再以3‑5%的体积比接种芽孢杆菌混合物，进行发酵，30~35℃条件下，100～200rpm振荡培养24~48h，至菌悬液菌含量的终浓度为10⁷~10¹⁰cfu/g；制得发酵产物；（2）洗涤：将步骤（1）获得的发酵产物，以4000~8000rpm转数离心2~5min，以收集菌体；以50倍质量的PBS缓冲液混合，充分搅拌1~5min后，收集混合液；（3）益生菌配比：将收集的混合液；按1:1的质量比加入大豆粉，再混合均匀；（4）干燥：上述步骤（3）所得的混合物与营养饲料混合，混合物与营养饲料总重量比为1：2~10，干燥24~36h，产物水份含量为2~5%，制得芽孢杆菌剂，其中：所述的营养饲料为：黄粉虫沙50～70份；马尾藻粉：25～40份；海蒿子15～35；大豆蛋白10～15份；鱼粉：5～10份；螺旋藻2～5份；贻贝粉2～5份；低聚壳聚糖：1～4份；复合多维1～4份；复合多矿1～4份；（5）向步骤（4）所得到的芽孢杆菌剂中，按照1:1~4的质量比，加入麦饭石，充分混合均匀后球磨，球磨条件为：按10~30：1的质量比装入钢球和沉淀物；球磨转速设为350~450r/min，球磨时间为2~4h，使得终产物的产品粒度为纳米级~微米级。