主权项 |
本发明所述的一种黄梁木植株高效再生方法,其主要特征在于:A无菌苗的获得:将种子置于40℃恒温摇床上震荡浸泡24h~48h;在无菌超净台上,用10%NaClO溶液灭菌10min~15min,无菌水彻底冲洗5次,将种子播于不含任何激素的MS培养基中培养。B子叶和不胚轴外植体的获得:种子培养20d~25d后,切取无菌苗中带子叶柄的子叶和下胚轴作为外植体。C不定芽诱导分化:将外植体接种于添加TDZl.0~5.0mg/L+NAA0.05mg/L的DCR培养基中;培养20d~30d后,将外植体转移到添加6‑BA3.0~5.0mg/L+NAA0.05mg/L的DCR培养基中培养。D增殖培养:在超净台上,从外植体丛生芽中剪取粗壮的单株芽,接种于添加6‑BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L的MS培养基中培养。E生根培养:选取增殖培养得到的健壮幼苗,切掉腋芽和稍大的叶片,置于1/2MS+IBA0.1mg/L和NAA0.05mg/L生根培养基诱导生根。F炼苗与移栽:生根培养10d后,将带瓶的组培苗移到温室中适应外界环境1d,然后将组培瓶盖从半开到全开炼苗,喷雾保持瓶内湿度;3d后将组培苗小心取出,洗净粘于根上的培养基,移栽到黄土和泥炭土混合比例为1:2的基质上,在移栽一周内,控制相对湿度75%~85%,温度20℃~35℃;10d后按生长需求浇水。 |