一种基于分子印迹膜过滤技术的埃博霉素B分离提取方法

摘要

本发明公开了一种基于分子印迹膜过滤技术的埃博霉素B分离提取方法，其步骤是发酵液经大孔树脂吸附，乙酸乙酯解析后，得粗品；粗品首先经微滤膜、超滤膜除去大分子等杂质；再将上述滤液经过埃博霉素B分子印迹聚合物膜过滤得到纯的埃博霉素B液体；最后经过结晶得到埃博霉素B。本发明便于连续操作、易于放大、操作简单、成本低、选择性高，可快速地将埃博霉素B分子从其结构类似物的混合物中分离出来，易于实现工业化生产。

主权项

一种基于分子印迹膜过滤技术的埃博霉素B分离提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）树脂对发酵液进行吸附：将纤维堆囊菌在液体培养基中进行发酵，并向液体培养基中加入经过处理的大孔树脂，发酵结束后，过滤得到吸附树脂；其中，大孔树脂的加入量为液体培养基体积的2‑5%；（2）乙酸乙酯浸提：用乙酸乙酯浸提吸附树脂，收集浸提液；（3）浸提液的初步过滤：将浸提液首先通过孔径为0.2‑0.5um的微滤膜过滤，除去残留的菌体，得到滤液；再将滤液采用截留分子量为1000‑5000的超滤膜过滤以去除大分子杂质，收集滤液，得到粗提物；（4）埃博霉素B分子印迹膜过滤：首先将博霉素B分子印迹聚合物膜固定在透过装置的原料池和透过池之间，向原料池中加入粗提物，透过池中加入乙酸乙酯，将透过装置密封，搅拌下进行15‑30min后，收集透过液得到埃博霉素B溶液；（5）结晶：将埃博霉素B溶液进行真空浓缩，得到浓缩液，再将浓缩液于‑20～‑10℃下进行结晶，得到白色粉末状结晶，即为埃博霉素B。