一种植物体内羟基自由基的测定方法

摘要

本发明涉及一种电子自旋共振结合二级自由基自旋捕获技术测定植物体内羟基自由基的方法。该方法选取二甲基亚砜(DMSO)作自由基一级捕获剂，用N-叔丁基-α-苯硝酮(PBN)作自由基二级捕获剂，经过一系列的捕获、提取后，用电子自旋顺磁共振(ESR)测定植物样品中的羟基自由基。

主权项

一种植物体内羟基自由基的测定方法，选取二甲基亚砜及N‑叔丁基‑α‑苯硝酮作羟基自由基捕获剂，经过一系列的捕获、提取后，用电子自旋顺磁共振测定植物体内自由基加合物浓度，所述测定方法包括如下步骤：1)自由基捕获剂的配制：称取N‑叔丁基‑α‑苯硝酮，在室温下溶解在二甲基亚砜中，配制成10‑100mM的N‑叔丁基‑α‑苯硝酮的二甲基亚砜溶液；2)称取新鲜植物体组织0.2‑1.5g，剪碎放于玻璃组织研磨器中，加入步骤1)中配制的0.5‑1.5ml10‑100mM N‑叔丁基‑α‑苯硝酮的二甲基亚砜溶液，于冰浴中研磨1‑5分钟至均匀；3)将步骤2)所得研磨液转移至离心管中，于20‑45℃水浴中温浴5‑20分钟，将离心管置于冷冻离心机中，于0‑4℃下2000‑6000g离心3‑10分钟；和4)将步骤3)所得的样品，取上清液装入石英玻璃样品管，用电子自旋顺磁共振仪检测。