| 摘要 |
1. Способ обнаружения модифицированного нуклеотида в составе исследуемой РНК, включающий получение контрольной РНК, двух олигонуклеотидных зондов разной длины, комплементарных исследуемой РНК, при этом один из зондов, имеющих меньшую длину, комплементарен РНК в области, содержащей исследуемый нуклеотид, и имеет температуру плавления меньшую, чем температура плавления второго зонда, один из зондов содержит молекулу донора флуоресценции, а другой - тушитель флуоресценции, при этом донор флуоресценции и тушитель флуоресценции подобраны с обеспечением перекрывания диапазона длин волн испускаемого донором флуоресценции излучения с диапазоном длин волн излучения, поглощаемого тушителем флуоресценции; смешение зондов с исследуемой и контрольной РНК, после чего полученные смеси подвергают нагреву до температуры, обеспечивающей полную денатурацию исследуемой РНК и зондов, медленному охлаждению до температуры, обеспечивающей образование стабильных дуплексов между РНК и зондами, и повторному медленному контролируемому нагреву с одновременным облучением и измерением интенсивности флуоресценции и получением кривых плавления для исследуемой и контрольной РНК, при этом выводы о наличии или отсутствии модификации в исследуемом нуклеотиде РНК делают по итогам сравнения кривых, и при совпадении характера кривых и/или температуры плавления делают вывод о наличии/отсутствии модификации в исследуемой РНК при наличии/отсутствии модификации в контрольной РНК в зоне гибридизации более короткого зонда.2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве контрольной РНК используют РНК с известной структурой в исс |
