检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物、探针及其方法

摘要

本发明公开了检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物、探针及其方法。检测PRRSV的荧光定量RT-PCR引物和探针，引物包括AM-PRRSV引物对和EU-ORF1a引物对，探针包括AM-V-PRRSV-P探针、AM-C-PRRSV-P探针、EU-PRRSV-P探针；检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法,该方法利用引物和探针进行多重荧光定量RT-PCR扩增，扩增后收集荧光信号，出现扩增曲线者为阳性。其特征在于，所述的RT-PCR扩增体系包括所述的引物和探针。本发明可同时检测PRRSV美洲型经典毒株、HP-PRRSV以及欧洲型毒株，具有特异性强、敏感性高、自动化程度高、快速简便等优点。

主权项

检测PRRSV的荧光定量RT‑PCR引物和探针，引物包括AM‑PRRSV引物对和EU‑ORF1a引物对，探针包括AM‑V‑PRRSV‑P探针、AM‑C‑PRRSV‑P探针、EU‑PRRSV‑P探针，其特征在于，所述AM‑PRRSV引物对的上游引物核苷酸序列为5'‑ GAGTGGGTCGGCTCCAGTTC ‑3'，下游引物核苷酸序列为5'‑ GCCTCATATTCCGTCTGTGA ‑3'；所述EU‑ORF1a引物对的上游引物核苷酸序列为5'‑ CGACATACTGCTTCTTAC ‑3'，下游引物核苷酸序列为5'‑ CGGTATTTGAATAACCACA ‑3'；所述的AM‑V‑PRRSV‑P探针为5'‑F‑ TAGAACTGTGACAACAACGCTGA ‑Q‑3'； 所述的AM‑C‑PRRSV‑P探针为5'‑F‑ AACTGTGTCTCGACCGGTGAC ‑Q‑3'；所述的EU‑PRRSV‑P探针为5'‑F‑ CCTTGCTATGACCAGTTGTGTTCC ‑Q‑3'；其中F为报告荧光基团，Q为淬灭荧光基团。