发明名称 |
盐析和部分溶解洗涤法纯化IFN-τ包涵体蛋白的方法 |
摘要 |
本发明涉及一种依靠盐析和部分溶解洗涤法纯化IFN-τ包涵体蛋白的方法,通过盐析、部分溶解盐析沉淀、复性即可获得高纯度高活性的蛋白质,不需要再进行诸如离子交换色谱、分子筛等既繁琐费事又成本高昂的精纯化操作,蛋白纯度即可高达90%以上,达精纯化标准,目的蛋白损失量小,蛋白活性良好。该方法具有成本低廉、操作简单、重复性好、快速高效的优点,适于大规模工业化生产。 |
申请公布号 |
CN103724421A |
申请公布日期 |
2014.04.16 |
申请号 |
CN201410013433.0 |
申请日期 |
2014.01.13 |
申请人 |
吕丽燕 |
发明人 |
吕丽燕 |
分类号 |
C07K14/555(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I |
主分类号 |
C07K14/555(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
盐析和部分溶解洗涤法纯化IFN‑τ包涵体蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)表达蛋白质的工程菌发酵后,收集、裂解菌体,然后收集、洗涤包涵体,并用包涵体溶解液溶解包涵体,再以40%饱和度硫酸铵溶液进行盐析沉淀;2)取用盐析沉淀同体积的包涵体溶解液,以部分溶解方式溶解盐析沉淀,离心后检测上清中的目的蛋白纯度,丢弃上清,留取沉淀;3)将所留沉淀重复进行步骤2)操作,重复2‑4次,最后将剩余沉淀充分溶解并复性,即可获得高纯度高活性的蛋白质。 |
地址 |
250000 山东省济南市槐荫区济兖路440号山东省肿瘤医院 |