Complejo de interferón beta

摘要

Procedimiento para producir un complejo de interferón b que tiene un polietilenglicol unido de manera específica ycovalente a un residuo de lisina en las posiciones 19 ó 134 en la secuencia de aminoácidos del interferón b o en lacorrespondiente posición a las mismas en una secuencia de aminoácidos de un mutante del interferón b, quecomprende: unir de manera específica y covalente polietilenglicol, que tiene un peso molecular de 10.000 o superiory está activado con un grupo funcional reactivo con un grupo amino, a un residuo de lisina del interferón b según laSEQ ID NO: 1 o un mutante del interferón b según la SEQ ID NO: 1 que presenta una deleción, sustitución o adiciónde uno o varios aminoácidos, en presencia, como mínimo, de un aditivo a una concentración del 1-50% en pesoseleccionado del grupo que comprende oligosacáridos que tienen 5 o menos unidades de azúcar, monosacáridos,sus correspondientes alcoholes de azúcares y alcoholes polihídricos C2-6, a pH 5,0-8,5; y extraer, después de lareacción de unión, el interferón b no reaccionado, el polietilnglicol y los subproductos mediante la utilización de unportador de intercambio iónico para purificar y concentrar el complejo de interferón b que tiene polietilenglicol unidode manera específica y covalente a un residuo de lisina en las posiciones 19 ó 134 en la secuencia de aminoácidosdel interferón b o en la correspondiente posición a las mismas en una secuencia de aminoácidos de un mutante delinterferón b, en el que el complejo interferón b mantiene una actividad del 10% o superior de la actividad antiviral delinterferón b que no se ha unido a un polietilenglicol, cuando la actividad antiviral del interferón b se determinamediante un bioensayo utilizando células FL de amniocitos humanos y el virus sindbis o el virus de la estomatitisvesicular combinados.