用于亲合分析的结合性表面

摘要

本发明提供了不饱和的、或者不饱和的并且被定向的结合性表面，并且提供了用于制备不饱和的、或者不饱和的并且被定向的结合性表面的方法和组合物。提供了制备结合性表面的方法以用于制备亲合分析用支持物表面，该方法包括使用顺磁性微粒上不饱和的、或者不饱和的并且被定向的结合性表面。该方法包括制造基于配体::支持物连接物的复合物的方法，包括下述工艺：任选地使用低的配体对支持物连接物的投入比率，稀释，使用嵌段共聚物进行分散和/或涂敷。提供了使用生物素-BSA和生物素-卵清蛋白结合性表面、以及涂敷链霉抗生物素蛋白的微粒、和涂敷有捕获部分比如生物素化免疫球蛋白或其片段的微粒的具体实施例。提供了将配体偶联于固体表面的其他实施例。提供了这些方法和与多种分析物和捕获部分相连的组合物的应用。提供了用于免疫测定的不饱和的、或者不饱和的并且被定向的结合性表面。另外，提供了分散的微粒和它们的制造方法。

主权项

一种用于亲合分析的不饱和的结合性表面，其包含：a）分析物支持物，所述分析物支持物包含微粒、微珠、微孔板、涂敷试管、以Mylar做后衬的硝化纤维支持物、尼龙支持物、微小管、纳米颗粒、纳米管、或者顺磁性材料或超顺磁性材料；b）至少一种支持物连接物，其中，少于饱和量的支持物连接物与所述分析物支持物偶联，所述支持物连接物包括蛋白质；c）与所述支持物连接物偶联的配体，所述配体包括生物素；d）嵌段共聚物，其中所述嵌段共聚物包含疏水性的头部基团，所述疏水性的头部基团的侧翼为至少两个亲水性尾部基团，并且其中所述疏水性的头部基团接触所述分析物支持物；e）至少一种与所述配体相连接的配体结合剂；以及f）与所述配体结合剂相连接的捕获部分，其中，所述不饱和的结合性表面具有0.5×10‑2至2.0×10‑1微摩尔配体/平方米所述分析物支持物；所述捕获部分以1.0×10‑4微摩尔/平方米至2.0×10‑2微摩尔/平方米分析物支持物的密度存在于所述分析物支持物上；所述支持物连接物被生物素化从而使得生物素对支持物连接物的摩尔掺入比率小于或等于5:1；所述配体结合剂以1.0×10‑2至5.0×10‑2微摩尔/平方米所述分析物支持物的密度存在于所述分析物支持物上；所述至少一种支持物连接物以1.2×10‑2至7.5×10‑2微摩尔/平方米所述分析物支持物的密度存在于所述分析物支持物上；并且所述生物素以1.6×10‑2至2.0×10‑1微摩尔/平方米所述分析支持物的密度存在。