发明名称 一种检测液体中内毒素含量的方法
摘要 本发明公开了一种检测液体中内毒素含量的方法,通过混合待测液体与重组鲎C因子,经与多肽修饰电极接触反应后,测该电极在电解液中的电化学响应来获知待测液体中内毒素的浓度;在制备鲎C因子时,采用基因工程的手段,重组表达出鲎C因子。本案通过电化学技术直接得出结果,不受比色法等传统方法中样品颜色的干扰;避免使用鲎试剂,可以降低检测成本并且一定程度上减轻生态压力;专一对内毒素起反应,避免了传统鲎试剂反应中G因子旁路的干扰;同时,使用基因工程的方法,保证了检测方法中试剂批次间的均一性,有利于产业化生产。
申请公布号 CN103675051A 申请公布日期 2014.03.26
申请号 CN201310712306.5 申请日期 2013.12.20
申请人 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 发明人 缪鹏;王弼陡;罗刚银;钱庆;王钟周;程文播
分类号 G01N27/26(2006.01)I 主分类号 G01N27/26(2006.01)I
代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 代理人 史霞
主权项 一种检测液体中内毒素含量的方法,包括以下步骤:步骤1)将含饱和鲎C因子的水溶液加入到待测液体中,得到一混合液,待测液体中的内毒素能够激活所述鲎C因子,产生活性鲎C因子;步骤2)将经过修饰的电极插入到所述混合液中,电极表面与所述活性鲎C因子发生酶切反应,电极表面的电化学性质被改变;随后取出电极,插入到另一含电化学活性物质的电解液中,测该电极对所述电解液的电化学响应值;步骤3)配制至少三个含特定浓度的内毒素标准液,按照步骤1)和2)进行操作后得到相应的至少三组电化学响应值,并将所得电化学响应值绘成标准曲线;将步骤2)中所得电化学响应值与所述标准曲线进行比对,从而得出所述待测液体的内毒素含量;其特征在于,步骤1)中所用鲎C因子是采用基因重组的方法制得。
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