一种促进兰州百合组培鳞茎膨大发育的方法

摘要

本发明涉及一种促进兰州百合组培鳞茎膨大发育的方法，属于植物种苗繁育领域，具体来讲涉及一种促进兰州百合组织培养中诱导鳞茎发育的方法。本发明通过改善兰州百合组培快繁技术，即丛芽增殖、小鳞茎的诱导、小鳞茎的膨大、鳞茎的膨大与壮苗及完整植株的形成四个阶段促使其鳞茎膨大发育生长。操作过程与培养试管苗类似，培养完成后获得具有膨大鳞茎的完整植株，可作为生产用的繁殖原始材料直接移入大田种植，大幅度提高了繁殖系数，缩短了兰州百合的生长周期，有利于兰州百合的广泛种植和推广，具有良好的经济效益和社会效益。

主权项

一种采用四阶段培养的技术路线诱导兰州百合鳞茎膨大发育的方法，其特征在于： 包括如下四阶段：①第一阶段丛芽增殖：将剥取兰州百合外、中层干净的鳞片，用自来水冲洗晾干后，使用75%乙醇浸泡消毒20~30秒钟，再用0.1%的升汞溶液浸泡10~12分钟，然后用无菌水冲洗3次后晾干，将上述晾干的鳞片接种到F1培养基进行培养，培养条件为：培养周期为30天，培养温度为25℃，培养光照强度为2000~4000Lux，光周期为9h Light/15h Dark，所述F1培养基包含MS培养基、0.2~0.4mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤、0.04~0.06mg/L萘乙酸、20~40g/L蔗糖和4.5g/L琼脂，该阶段培养进行2次以上形成丛生芽；②第二阶段小鳞茎的诱导：将第一阶段所得的丛芽苗切割除去叶片，将余下的芽体转接到F2培养基，以培养基F2为鳞茎诱导发育培养基，进行鳞茎的诱导形成及增殖，培养条件为：培养周期为30~40天，培养温度为25℃，培养光照强度为2000~4000Lux，光周期为9h Light/15h Dark，所述F2培养基包含MS培养基、80~100g/L蔗糖和4.5g/L琼脂；③第三阶段小鳞茎的膨大：将第二阶段所得的分化鳞茎切割下来，并切除叶片，将其移植到F3培养基，以培养基F3为鳞茎膨大发育培养基，进行小鳞茎的膨大生长，培养条件为：培养周期为30~40天，培养温度为25℃，培养光照强度为2000~4000Lux，光周期为9h Light/15h Dark，所述F3培养基包含1.5倍MS培养基、0.12~0.18mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤、0.12~0.18mg/L赤霉素、60~80g/L蔗糖和4.5g/L琼脂；④第四阶段鳞茎的膨大与壮苗及完整植株的形成：将第三阶段所得的膨大鳞茎切割下来，并切除叶片，将其移至到F4培养基，以培养基F4为鳞茎进一步膨大发育并生根壮苗培养基，进行鳞茎的膨大生长及完整植株的形成，培养条件为：培养周期为30天，培养温度为25℃，培养光照强度为2000~4000Lux，光周期为9h Light/15h Dark，所述第四阶段中F4培养基包含MS、0.8~1.2mg/L多效唑、80~100g/L蔗糖和4.5g/L琼脂。