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一种糖类过敏原的测定方法，其特征在于利用氧化锌量子点标记糖类过敏原；同时在电解池中的芯片上固定化一层凝集素，在一系列已知浓度的待测糖类过敏原溶液中，使标记了氧化锌量子点的糖类过敏原和芯片上的凝集素进行特异性结合，把标记在糖类过敏原上的氧化锌量子点连接到芯片上；然后用酸性溶液把氧化锌量子点溶解为锌离子，用溶出伏安法测定溶出的锌离子的浓度，建立锌离子浓度与糖类过敏原浓度之间的关系，从而确定待测糖类过敏原浓度;所述糖类过敏原的测定方法具体包括以下步骤：a.将0.5～5毫克氧化锌量子点分散到50～200微升1纳克／毫升的糖类过敏原溶液中，在室温下震荡10min，离心，用pH值为6.8～7.5的磷酸盐缓冲溶液清洗三次，再加500μL1～2%w/v牛血清蛋白，15～35℃下震荡10～30min，离心，用pH值为6.8～7.5的磷酸盐缓冲溶液清洗三次；最终分散于50～150μL0.05～0.1%v/v曲拉通X‑100磷酸缓冲溶液，不用时保存于冰箱保温层；b.将二氧化硅片或玻璃片分别在丙酮、乙醇和水中分别超声5min，然后在60～80℃的NH4OH/H2O2/H2O1:1:5～7,v/v和HCl/H2O2/H2O1:1:4～6,v/v分别浸泡5～10min；拿出后用清水洗干净，晾干；然后放入5%v/v的3‑胺丙基乙氧基硅烷的乙醇溶液中浸泡2～5h，洗干净、晾干，再放入10～15mL含1～2%v/v戊二醛pH值为6.8～7.5的磷酸盐缓冲溶液，于4℃静置8～12h，随后用去离子水清洗、晾干，待用；c.将修饰后的芯片安装在一个孔径小于芯片边长的电解池中，将50μL含1～2mg/mL凝集素pH值为6.8～7.5的磷酸盐缓冲溶液滴在上述处理好的芯片上,并于4℃静置8～12h,随后用去离子水清洗；然后将上述芯片用含0.5～1%w/v牛血清蛋白和0.05～0.1%v/v吐温‑20浸泡0.5～1h,随后用去离子水清洗、待用；d.将处理好的待测样品滴在制备好的芯片上，放置15～50min,用去离子水清洗芯片表面3次；e.向电解池中注入pH值为1～3的盐酸溶液溶解芯片上的氧化锌量子点，并用pH值为1～3盐酸溶液洗三次，合并溶解液和洗液，加pH值为6.8～7.5的磷酸盐缓冲溶液至1～3毫升；f.用铂电极为对电极，银/氯化银电极为参比电极，汞膜电极为工作电极，‑ 0.8～‑1.5伏富集90～150秒，用方波伏安法测锌的溶出峰，电位约在‑1.1伏；g.改变第1步糖类过敏原浓度，重复第e、f、g步，测定一系列糖类过敏原浓度相对应的锌的溶出伏安峰的峰值电流，建立峰值电流与糖类过敏原浓度之间的对应关系。 |
