一种制备单宁酶的方法

摘要

一种制备单宁酶的方法，涉及单宁酶，提供一种制备单宁酶的方法。包括：将黑曲霉接种于培养基中，发酵培养后获得含单宁酶培养基，分离含单宁酶培养基获得单宁酶。所述培养基为茶叶梗粉末与盐溶液的混合物。所述分离含单宁酶培养基的步骤包括：将柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液加入含单宁酶培养基中，振荡浸提，滤纸过滤即得粗酶液。将所得粗酶液进行脱色、过滤除菌。所得粗酶液再进行硫酸铵分级沉淀或超滤浓缩，得单宁酶。本发明创新性地采用茶叶梗固态发酵生产单宁酶，开辟了农业废弃物茶叶梗资源利用的新道路。本发明优化了茶叶梗固态发酵生产单宁酶的条件，在优化的条件下酶活达到62U/gds，是优化前的5.17倍。

主权项

一种制备单宁酶的方法，其特征在于包括：将黑曲霉接种于培养基中，发酵培养后获得含单宁酶培养基，分离含单宁酶培养基获得单宁酶；所述培养基为茶叶梗粉末与盐溶液的混合物；所述盐溶液中包括NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、NaCl；所述盐溶液中的NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4、NaCl的质量分数依次为1%、0.1%、0.1%、0.1%；所述发酵培养的条件为盐溶液pH 6.06；5.69% W/V的NH4Cl作为氮源，5% W/V的α‑乳糖作为外加碳源；所述茶叶梗粉末的质量与盐溶液的体积之比为1g︰(1‑2) mL。