一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法

摘要

本发明公开了一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法，包括以下步骤：步骤一，取小块人宫颈瘤变组织；步骤二，用I型胶原酶消化分解后制成细胞悬液；步骤三，利用台盼蓝拒染法对细胞的活性进行判定；步骤四，将细胞悬液接种到低胎牛血清培养基且经鼠尾胶原包被的培养瓶中，等待细胞贴壁；步骤五，细胞贴壁后更换无血清培养基对宫颈上皮内瘤变细胞进行纯化，每周更换至少两次培养液，待细胞融合至80％～85％后传代；利用该方法培养出来的CIN细胞成活率高，纯度高，传代后细胞的形态与原代无明显改变，携带人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)；CIN细胞体外培养成功，为宫颈癌的治疗研究提供了技术保障。

主权项

一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，取小块人宫颈瘤变组织，小部分进行HPV分型检测，部分进行培养；步骤二，用I型胶原酶消化分解后制成细胞悬液；步骤三，利用台盼蓝拒染法对细胞的活性进行判定；步骤四，将细胞悬液接种到低胎牛血清培养基且经鼠尾胶原包被的培养瓶中，等待细胞贴壁；步骤五，细胞贴壁后更换无血清培养基对宫颈上皮内瘤变细胞进行纯化，每周更换至少两次培养液，待细胞融合至80％～85％后传代；步骤六，通过免疫荧光检测对细胞进行鉴定，通过PCR对HPV进行分型检测。