发明名称 一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法
摘要 本发明公开了一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法,其特征在于,步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型;然后对细胞进行培养,shRNA表达载体转染细胞,并进行荧光观察;用荧光定量进行检测。在对PERV进行培养的时候,需要及时吸取干净细胞培养液,之后再用洗脱缓冲液进行预热3-10分钟。最后需要在48小时后用荧光显微镜观察细胞转染效率并收集细胞检测shRNA的干扰效果。本发明的有益效果是,菌块能够彻底混匀,裂解效果良好,提取量和纯度都比较高,操作简便,成本不高。
申请公布号 CN103602731A 申请公布日期 2014.02.26
申请号 CN201310525126.6 申请日期 2013.10.31
申请人 徐丽 发明人 徐丽
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法,其特征在于,步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型;然后对细胞进行培养,shRNA表达载体转染细胞,并进行荧光观察;用荧光定量进行检测。
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