一种运用ELISA测定蛋白质浓度的方法

摘要

本发明涉及免疫检测领域，特别涉及一种运用ELISA测定蛋白质浓度的方法。该方法将待测蛋白质的抗体与酶标记抗体混合获得混合抗体，运用ELISA测定蛋白质浓度。本发明提供的方法准确度较高，重现性较好，简化操作步骤，节约测定时间。

主权项

一种运用ELISA测定蛋白质浓度的方法，其特征在于，包括如下步骤：取待测蛋白质的抗体经第一稀释后获得第一抗体；取酶标记抗体经第二稀释后获得第二抗体；取所述第一抗体与所述第二抗体混合获得混合抗体，所述第一抗体与所述第二抗体的摩尔浓度之比为1∶0.0625～1∶2；取待测蛋白质的标准品获得系列浓度的标准溶液，取所述标准溶液包被基板，第一孵育、洗板、封闭后，加入所述混合抗体，第二孵育后加入所述酶的底物显色，终止反应后，测得所述系列浓度的标准溶液的吸光度值，获得标准曲线；取待测蛋白质获得待测溶液，取所述待测溶液包被基板，第三孵育、洗板、封闭后，加入所述混合抗体，第四孵育后加入所述酶的底物显色，终止反应后，测得吸光度值，与所述标准曲线比较，获得所述蛋白质的浓度。