发明名称 亨廷顿蛋白的棕榈化修饰方法
摘要 本发明公开了一种亨廷顿蛋白的棕榈化修饰方法,包括以下步骤:(1)、获取重组蛋白Htt(1-90):a、亨廷顿蛋白基因的获得;b、重组表达质粒pTWIN1-htt的构建;c、表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α-htt的构建;d、重组蛋白的表达;(2)、重组蛋白Htt(1-90)的纯化;(3)、SPPS方法获得棕榈化修饰的Htt(Cys-K92-K158)多肽;(4)Htt(Cys-K92-K158)多肽的纯化;(5)Htt(Cys-K92-K158)多肽与重组蛋白Htt(1-90)经过偶联获得经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1-158);(6)经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1-158)的纯化。通过对亨廷顿蛋白的棕榈化修饰,显示出蛋白的稳定性增加,棕榈化蛋白有对抗水解酶的能力,显示出棕榈化蛋白有较强的稳定性,因此研究亨廷顿蛋白的棕榈化对亨廷顿疾病的治疗有重要意义。
申请公布号 CN103601796A 申请公布日期 2014.02.26
申请号 CN201310555189.6 申请日期 2013.11.11
申请人 杭州璞题生物科技有限公司 发明人 王喆明
分类号 C07K14/47(2006.01)I;C07K1/107(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 主分类号 C07K14/47(2006.01)I
代理机构 杭州华知专利事务所 33235 代理人 宁冈
主权项 一种亨廷顿蛋白的棕榈化修饰方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、获取重组蛋白Htt(1‑90):a、亨廷顿蛋白基因的获得;b、重组表达质粒pTWIN1‑htt的构建;c、表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α‑htt的构建;d、重组蛋白的表达;(2)、重组蛋白Htt(1‑90)的纯化;(3)、SPPS方法获得棕榈化修饰的Htt(Cys‑K92‑K158)多肽;(4)Htt(Cys‑K92‑K158)多肽的纯化;(5)Htt(Cys‑K92‑K158)多肽与重组蛋白Htt(1‑90)经过偶联获得经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1‑158);(6)经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1‑158)的纯化。
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