由茶碱调控其靶特异性核糖核酸的取代活性的变构反式剪接I型核酶

摘要

提供了由茶碱调控靶特异性核糖核酸的取代活性的变构反式剪接I型核酶，其中靶向hTERT的反式剪接核酶识别人端粒酶反转录酶(hTERT)的mRNA作为癌症特异性RNA转录物以通过通信模块将茶碱适体连接到hTERT靶反式剪接核酶上，所述hTERT靶反式剪接核酶具有被证实的反式剪接的能力。变构反式剪接I型核酶可以有利地选择性仅诊断表达靶hTERT RNA的细胞，或者诱导它们的细胞凋亡，这是由于变构反式剪接I型核酶的活性依赖性地受到茶碱的调控以通过反式剪接来更正靶hTERT RNA。

主权项

一种选择由茶碱调控其活性的变构反式剪接I型核酶的方法，该方法包括：制备其中茶碱适体和通信模块结合到反式剪接核酶的P6区和P8区中任一者或两者上的适体酶、其中茶碱适体和通信模块结合到P9区被部分地除去的反式剪接核酶的P6区和P8区中任一者或两者上的适体酶、或者其中茶碱适体和通信模块结合到P9区被部分地修饰的反式剪接核酶的P6区和P8区中任一者或两者上的适体酶；通过使用茶碱和咖啡因来确定是否发生依赖于茶碱的反式剪接反应以比较体外制备的适体酶的变构调控；以及通过哺乳动物细胞内的荧光素酶活性来确定依赖于茶碱的转基因在0.1‑1mM的茶碱存在下是否被表达，所述适体酶为所述变构反式剪接I型核酶，所述变构反式剪接I型核酶为在SEQ ID NO:1、2、3或7中描述的RNA序列。