一种融合基因原核表达中引物的生成方法

摘要

本发明公开了一种融合基因原核表达中引物的生成方法。具体方法为：首先根据基因库中小鼠CＲT和PD－1基因序列，设计2对特异性引物，以小鼠淋巴细胞CDNA为模板PCＲ克隆获得mCＲT、mPD1目的片段；其中在mCＲT上、下游引物分别引入NcotⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点，mPD1上、下游引物分别引入BamHⅠ和XholⅠ限制性内切酶位点。本发明的有益效果是，所得产物经SDS－PAGE检测后，在45kDa处显示特异条带，最后经WesternBlotting鉴定，所纯化蛋白能被CＲT抗体和PD1抗体抗体识别；获得较纯的融合蛋白，所构建的载体可为进一步研究两者的功能和免疫学特性及肿瘤的免疫治疗奠定了基础。

主权项

一种融合基因原核表达中引物的生成方法，其特征在于：根据基因库中小鼠CＲT和PD－1基因序列，设计2对特异性引物，以小鼠淋巴细胞CDNA为模板PCＲ克隆获得mCＲ T、mPD1目的片段；其中在mCＲT上、下游引物分别引入NcotⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点，mPD1上、下游引物分别引入BamHⅠ和XholⅠ限制性内切酶位点。