用于扩增土壤线虫CO I基因的简并引物组合及其应用

摘要

本发明提供一种用于扩增土壤线虫COI基因的简并引物组合，所述引物组合包括7COX1JB-F1和7COX1JB-R1以及7COX1JB-F2和7COX1JB-R2（如Seq ID No.1-4所示）。本发明利用巢式PCR的方法扩增出土壤线虫的部分COI基因片段，利用该片段可以有效地对土壤线虫进行分类鉴定，对操作人员要求不高，只需熟练PCR操作即可，即使完全没有线虫形态分类鉴定知识的人也可轻松完成，且一次巢式PCR就可以同时完成大量样品的分类鉴定，节约了鉴定时间，与传统方法相比，本发明选择了COI基因，分辨率更高，可以更有效地对土壤线虫进行种的区分，同时填补了土壤线虫分类鉴定领域的空白。

主权项

用于扩增土壤线虫CO I基因的简并引物组合，其特征在于，包括：第一对引物：7COX1JB‑F1:5’‑ATACCTWSWWTAATYGGDGGKTTTGG‑3’，7COX1JB‑R1:5’‑AYACCHGTTAAMCCRCCHAHAGTAAA‑3’；以及第二对引物：7COX1JB‑F2:5’‑GGDGCHCCTGATATRAGNTTYCCHCG‑3’，7COX1JB‑R2:5’‑ACYTTHACHCCNGTHGGNACAGCAAT‑3’；其中，Y代表碱基C或T，W代表碱基A或T，K代表碱基G或T，D代表碱基G、A或T，R代表碱基A或G，M代表碱基A或C，H代表A、T或C，S代表G或C，N代表A、T、C或G。