在细胞环境中于单分子水平上分析蛋白-蛋白相互作用的方法，和测定在细胞溶质中激活的蛋白密度的方法

摘要

本发明公开了一种在单分子水平上分析蛋白-蛋白相互作用的方法。本发明通过以下方法实现：准备一个基片，在其上结合有第一蛋白结合分子，以形成分子筛，所述分子筛与第一蛋白结合；加入包含有第一蛋白的细胞溶质从而诱导第一蛋白与第一蛋白结合分子筛的结合；当第一蛋白和第一蛋白结合分子筛结合至基片后，向基片中加入含有标记物标记的第二蛋白的细胞溶质；分析在基片上第一蛋白和第二蛋白之间的相互作用。根据本发明，比较和分析可以在每一个细胞中进行，通过向第一蛋白中加入不同种类的细胞，观察第一蛋白与第二蛋白之间的相互作用，能够比较和分析出第一蛋白的激活水平。

主权项

一种在单分子水平上分析第一蛋白和第二蛋白之间的相互作用的方法，包括：（a）准备至少两个基片，其中，在每个基片上结合有第一蛋白结合分子，所述第一蛋白结合分子为将要与第一蛋白结合的生物分子；（b）分别在第一基片和第二基片上诱导所述第一蛋白和所述第一蛋白结合分子之间的结合，包括将对照组细胞所包含的第一蛋白提供给所述两个基片中的第一基片，而将所述实验组细胞所包含的第一蛋白提供给所述两个基片中的第二基片；（c）当所述第一蛋白和所述第一蛋白结合分子分别与所述第一基片和所述第二基片结合时，将包含标记物标记的第二蛋白的细胞的细胞溶胞产物分别提供给所述第一基片和所述第二基片；和（d）将所述细胞溶胞产物分别提供给所述第一基片和所述第二基片后，比较和分析在所述第一基片和所述第二基片上第一蛋白和第二蛋白之间的相互作用。