发明名称 一种龙爪柳茎的增殖方法
摘要 本发明公开了一种龙爪柳茎的增殖方法,通过植物组织培养的方法以龙爪柳茎为外植体对龙爪柳茎进行增殖,在组织培养中所用培养基包括MS、0.01~1mg/L萘乙酸(NAA)、0.05~2mg/L玉米素、30g/L蔗糖和6.5g/L琼脂粉,根据本发明提供的方法,可快速稳定的对龙爪柳茎进行增殖,操作简单易控,增殖率高。
申请公布号 CN103548677A 申请公布日期 2014.02.05
申请号 CN201310496399.2 申请日期 2013.10.21
申请人 中国林业科学研究院林业研究所 发明人 张建国;饶国栋;睢金凯
分类号 A01H4/00(2006.01)I;C05G3/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙) 11426 代理人 路永斌;余光军
主权项 1.一种龙爪柳茎的增殖方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体的选取,包括以下子步骤:(1-1)每年4~10月选取龙爪柳当年生嫩茎的形态学上端4~5节,每一节作为一个外植体,冰袋保存;(1-2)将(1-1)中取得的外植体上叶片的形态学上端剪去,保留叶片的形态学下端0.5~1cm;(2)外植体灭菌,包括以下子步骤:(2-1)将(1)处理过的外植体以流动水冲洗;(2-2)将(2-1)中处理后的外植体移至超净工作台中进行以下操作:①用75%酒精对外植体进行表面灭菌30~60s,后用灭菌水冲洗酒精灭菌后的外植体;②在不断摇动的条件下,用0.5~1%次氯酸钠溶液对①处理后的外植体进行灭菌,6~8min;③用灭菌水冲洗经②处理后的外植体;(3)接种、培养,包括以下子步骤:(3-1)将步骤(2)处理后的外植体的形态学下端插入培养基中,每个培养基中接种4个外植体,置于组织培养室中在以下培养条件下培养:温度27℃,光照3000lx,14小时光周期;(3-2)继代培养:(3-1)中接种的外植体约2周后腋芽开始膨大,3~4周后腋芽抽出新叶,5~6周外植体长至3cm长后,继代至与(3-1)中所用培养基配比相同的培养基中进行继代培养,培养3个月左右,外植体长至10~15cm,得到继代龙爪柳茎;(3-3)增殖培养:将(3-2)中继代培养得到的继代龙爪柳茎取出,按照其节数,将每节叶片的形态学上端剪去,保留叶片的形态学下端0.5~1cm,移至与(3-1)中所用培养基配比相同的培养基中进行增殖培养;(4)重复步骤(2)~(3);其中,所述培养基包括:<img file="FDA0000399303270000021.GIF" wi="1404" he="508" />其中,所述g/L是基于每升培养基所述成分的重量。
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