小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因多重PCR检测引物组和试剂盒

摘要

本发明公开一种小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因多重PCR检测引物组和试剂盒。其是由检测小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rRNA和检测与小肠结肠炎耶尔森氏菌致病相关的粘附侵袭位点基因、耐热肠毒素A基因、粘附素基因、耐热肠毒素B基因、毒力活化因子基因以及O:3血清型抗原编码基因的引物对组成。本发明建立一种基于普通PCR平台的多重PCR检测方法，利用分析设计得到的所述引物对，对待测增菌液或平板分离菌落提取的DNA进行多重PCR反应，反应结束后对PCR产物进行电泳分析以确定样品中是否是小肠结肠炎耶尔森氏菌的同时，确定其含有的与小肠结肠炎耶尔森氏菌致病相关的毒力基因和判定是否为O:3血清型。

主权项

一种小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因多重PCR检测引物组，其特征在于，其是由检测小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rRNA及其毒力基因和血清型的引物对组成；其中，检测小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因和血清型的引物对是由检测粘附侵袭位点基因、耐热肠毒素A基因、粘附素基因、耐热肠毒素B基因、毒力活化因子基因、O:3血清型抗原编码基因的6个引物对组成；所述检测小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rRNA基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；所述检测粘附侵袭位点基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示；所述检测耐热肠毒素A基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示；所述检测粘附素基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示；所述检测耐热肠毒素B基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示；所述检测毒力活化因子基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示；所述检测O:3血清型抗原编码基因引物对的上下游引物的核苷酸序列分别由SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14所示。