果胶含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种果胶含量的测定方法，包括以下步骤：1)获得待测样品；2)在步骤1)的待测样品中加入浓度为0.5～5mol/L的三氟乙酸溶液进行水解，得待测样品水解物；3)将待测样品水解物用N2吹干的方式进行干燥处理，然后调节pH值至中性，并用水定容；4)称取作为标准品的半乳糖醛酸配成浓度为0.001mol/L～0.01mol/L的梯度标准溶液；5)将步骤3)的所得物和步骤4)所得的梯度标准溶液分别进行PMP衍生；6)采用HPLC测定衍生样品；7)以标准半乳糖醛酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标制作标准曲线；根据峰面积查待测样品在标准曲线上对应的浓度，从而计算待测物中的果胶含量。

主权项

1.果胶含量的测定方法，其特征是包括以下步骤：1）、获得待测样品：待测物为植物组织、果汁或果粒饮料；分别选用对应的以下方法：将植物组织切碎或匀浆，然后加入体积浓度为50~80%的乙醇煮沸10~30分钟，过滤，丙酮冲洗滤渣，干燥，所得细胞壁材料为待测样品；所述植物组织与所述乙醇的料液比为10g/150~250mL；果汁直接作为待测样品；将果粒饮料进行过滤，分别得果汁糖浆和果渣；将果汁糖浆作为待测样品；或者在果渣中加入质量浓度为50~80%的乙醇煮沸10~30分钟，过滤，丙酮冲洗滤渣，干燥，所得细胞壁材料为待测样品；所述果渣与所述乙醇的料液比为10g/150~250mL；2）、在步骤1）的待测样品中加入浓度为0.5~5mol/L的三氟乙酸溶液进行水解，水解时间为2~14h，水解温度为100~120℃；得待测样品水解物；当待测样品为细胞壁材料时，料液比为：1g待测样品/0.8~1.2ml的三氟乙酸溶液；当待测样品为果汁或者果汁糖浆时，料液比为：1ml待测样品/0.8~1.2ml的三氟乙酸溶液；3）、将待测样品水解物用N₂吹干的方式进行干燥处理，然后调节pH值至中性，并用水定容；4）、称取作为标准品的半乳糖醛酸配成浓度为0.001mol/L ~0.01mol/L的梯度标准溶液；5）、将步骤3）的所得物和步骤4）所得的梯度标准溶液分别进行PMP衍生： 在步骤3）的所得物/步骤4）所得的梯度标准溶液中分别加入浓度为0.1~1.0mol/L的PMP溶液、浓度为0.1~1.0mol/L的NaOH溶液以及浓度为0.0018~0.0022mol/L的半乳糖溶液，于60~80℃衍生20~40min；所述步骤3）的所得物/所述步骤4）所得的梯度标准溶液、PMP溶液、NaOH溶液和半乳糖溶液的体积比为1:0.9~1.1：0.9~1.1：0.12~0.13；将衍生后所得产物用0.1~1.0mol/L的HCl溶液中和至pH值为7，用氯仿萃取2~6次；萃取结束后过水膜； 6）、采用HPLC测定衍生样品：流动相A：乙腈+0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液；乙腈在流动相A中的体积浓度为15%；溶剂B：乙腈+0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液；乙腈在溶剂B中的体积浓度为40%；0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液为pH6.9；HPLC条件：色谱柱：Agilent Eclipse XDB C-18分离柱，检测器：waters 2998紫外检测器；检测波长：250nm；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；时间梯度：01030min；洗脱液由流动相A和溶剂B组成，溶剂B在洗脱液的体积浓度梯度为：015%25%；进样体积：10μL；7）、以标准半乳糖醛酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标制作标准曲线；根据峰面积查待测样品在标准曲线上对应的浓度，从而计算待测物中的果胶含量。