用于测定糖化血红蛋白百分比的方法

摘要

本发明提供在不需要单独测量血液样品中总血红蛋白含量的条件下，直接确定血液样品中总糖化血红蛋白百分比的方法。所述方法使用一种或两种不同类型的氧化剂，所述氧化剂选择性氧化血液样品中的低分子量还原物质和高分子量(主要是血红蛋白)还原物质，伴随由蛋白酶、果糖基氨基酸氧化酶、和过氧化物酶催化的酶促反应。本发明提供用于实施本发明方法的试剂盒。

主权项

第一氧化剂、第二氧化剂、蛋白酶、果糖基氨基酸氧化酶、过氧化物酶和颜色形成物质在制备用于在不以单独的过程测量血液样品中总血红蛋白的条件下，直接测定该血液样品中总糖化血红蛋白百分比或糖化血红蛋白A1c百分比的试剂盒中的用途，其中所述测定方法包括：a）使包含糖化肽或糖化氨基酸的蛋白质片段与所述果糖基氨基酸氧化酶相接触，从而产生过氧化氢（H2O2），其中所述蛋白质片段是通过使所述血液样品与下列各项相接触而产生的：1）溶解缓冲剂，其从血液样品中的红细胞中释放血红蛋白；2）所述第一氧化剂，其选择性氧化低分子量还原物质；3）所述第二氧化剂，其选择性氧化高分子量还原物质，和4）所述蛋白酶，其将糖化血红蛋白消化为糖化肽或糖化氨基酸；其中所述第一氧化剂选自由戴斯‑马丁氧化剂，N‑乙基马来酰亚胺，碘乙酸钠，高碘酸钠和氯胺‑T组成的组，所述第二氧化剂选自由四唑鎓盐，十二烷基硫酸钠，铁氰化钾(III)和碘酸钾组成的组；b）在所述过氧化物酶存在下，使在步骤a）中产生的H2O2与所述颜色形成物质相接触，从而产生可测量的信号；和c）在不单独测量所述血液样品中的总血红蛋白的条件下，通过将步骤b）中产生的信号应用于校准曲线来确定所述样品中总糖化血红蛋白的百分比或糖化血红蛋白A1c的百分比。