一种杨树单倍体培育方法

摘要

本发明公开了一种杨树单倍体的培育方法，属于杨树单倍体的选育领域。所述培育方法包括：1)将消毒处理后的杨树花药接种在愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养，获得杨树愈伤组织；2)将愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行不定芽的分化培养，获得杨树不定芽；3)将不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，获得试管小苗；4)经过倍性鉴定，获得杨树单倍体植株。本发明杨树单倍体的培育方法解决了杨树单倍体培育中所存在的问题，愈伤组织诱导率高，愈伤组织器官分化率高，繁殖率高，诱导繁殖操作步骤简单，可以在短期内形成大量优良的杨树试管苗，可进行规模化、工厂化生产，为杨树的育种、品质改良、遗传研究等提供了物质基础。

主权项

一种北京杨（Populus beijingensis）单倍体培育方法，包括如下顺序进行的步骤：1）消毒处理1‑A）将小孢子处于单核靠边期的花芽从柔荑花序上取下，用毛笔轻刷花芽鳞片表面后用无菌水冲洗花芽；1‑B）用酒精浸泡花芽；1‑C）用次氯酸钠溶液对花芽进行表面灭菌，用无菌水冲洗；1‑D）吸干花芽表面水分后在解剖镜下将花芽的鳞片剥去，从花序中取出花药；2）将消毒处理后的杨树花药接种在愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导培养，获得杨树愈伤组织，其中，所述愈伤组织培养基是：H基本培养基+奈乙酸1.0mg/L+6‑糠氨基嘌呤1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.5g/L；3）将杨树愈伤组织接种于不定芽分化培养基上进行不定芽的分化培养，获得杨树不定芽，其中，所述不定芽分化培养基是：MS培养基+6‑苄基腺嘌呤0.6mg/L+奈乙酸0.2mg/L+赤霉素0.02mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L；4）将杨树不定芽接种于生根培养基上进行生根培养，获得试管小苗；所述生根培养基是：1/2MS培养基+吲哚丁酸0.2‑0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L；5）经过倍性鉴定，获得杨树单倍体植株。