柑桔多甲氧基黄酮的提取及纯化方法

摘要

本发明公开了柑桔多甲氧基黄酮的提取及纯化方法，属于农副产品有效成分的提取及纯化技术领域。方法包括：(1)柑桔多甲氧基黄酮的提取；(2)柑桔多甲氧基黄酮粗提物的柱层析纯化等步骤工艺。本发明粗提物中川陈皮素和桔皮素的含量可分别达到30.8％和22.7％；所选用的大孔树脂对粗提物有较高的纯化效果，其总含量可达74.1-82.1％，总回收率可达45.9-68.6％；且具设备简单，工艺合理易行，成本低廉，产品能满足食品、保健品等需要的特点。本方法可在柑桔产地与生化企业中推广应用。

主权项

一种柑桔多甲氧基黄酮粗提物的提取与纯化方法，其特征在于：(1)柑桔多甲氧基黄酮的提取：1)柑桔皮的预处理：将柑桔皮干燥至含水量≤5％，磨粉过30目筛后，备用；2)柑桔多甲氧基黄酮的粗提与萃取：将柑桔皮粉500g和水5.0L拌匀，加热到100℃提取1h、过滤得水提液；将水提液与正己烷按体积比1∶0.5混合、萃取；将萃取液在40℃下减压蒸干，得到柑桔多甲氧基黄酮粗提物；经HPLC分析，该粗提物中含川陈皮素为30.8％，桔皮素为22.7％；(2)柑桔多甲氧基黄酮粗提物的柱层析纯化；1)粗提物溶液的配制：将柑桔多甲氧基黄酮粗提物5g溶解50％乙醇溶液500ml中，滤纸过滤后，备用；2)大孔树脂装柱：把预处理后的大孔树脂D‑101装入层析柱中至柱高25cm，柱内填装树脂至紧实；3)大孔树脂的吸附：把上述粗提物溶液500ml，用蠕动泵以1ml/min流速，花8.33h流经层析柱，并收集流出液；分析多甲氧基黄酮含量，可知层析柱对多甲氧基黄酮的总吸附率为99％；4)大孔树脂的洗脱、收集与浓缩干燥：先用蒸馏水以1ml/min的流速冲洗步骤(2)‑3)层析柱1～2h洗去杂质；然后以80％乙醇水溶液500ml为洗脱液，用蠕动泵以1ml/min流速流经层析柱，以每40ml为一管进行成分测定并收集，将1至6管的洗脱液合并得洗脱液1，把其余的洗脱液合并得洗脱液2；将洗脱液1与2分别减压浓缩、回收乙醇，残留物烘干、粉碎后，从前者得到以川陈皮素为主的纯化物1为1.012g，其中桔皮素和川陈皮素的含量分别为18.2％和63.9％；从后者得到以桔皮素为主的纯化物2为0.49g，其中桔皮素和川陈皮素 的含量分别为44％和33.5％；柑桔多甲氧基黄酮总回收率为68.6％。