提高厌氧发酵产丁二酸强度和浓度的方法

摘要

本发明属于工业发酵有机酸技术领域，涉及一种提高厌氧发酵产丁二酸强度和浓度的方法。本发明的技术要点在于，在发酵体系中添加表面活性剂，表面活性剂的加入量为：0.25~5g/L。通过添加表面活性剂的作用，来破坏细胞膜，提高膜内酶活性，加快细胞生长，缩短细胞生长周期。而且，表面活性剂对细胞渗透压起到调节作用，维持菌体活力，从而可以实现丁二酸的浓度与生产强度的提高，提高了生产效率，对工业化具有应用价值。

主权项

一种提高厌氧发酵产丁二酸强度和浓度的方法，包括菌种活化、种子培养、发酵产丁二酸的步骤；其特征在于，在所述的发酵产丁二酸步骤开始后6～7 h向发酵体系中加入以下表面活性剂中的一种：0.5g/L、1 g/L或2 g/L的壬基酚聚氧乙烯醚‑10、0.25 g/L的曲拉通X‑100、0.5 g/L的聚乙二醇；其中，所述的菌种活化步骤是：将产丁二酸微生物菌种在斜面培养基中进行平板划线后，在37℃厌氧培养箱中活化培养24 h； 所述的种子培养步骤是：将活化培养后的菌种转接到种子培养基中，37℃培养10～12 h后作为种子液； 所述的发酵产丁二酸的步骤：将种子液和灭好的葡萄糖接入发酵培养基中，接种量为体积比3～10%，温度为37℃，始终通入CO2气体来保持厌氧环境，整个发酵过程中pH控制在6.5～7.0；发酵培养基：以总还原糖浓度计葡萄糖 30 g/L并分开灭菌单独加入，酵母粉 10g/L，乙酸钠 1.36g/L，KH2PO4 3g/L，MgCl2•6H2O 0.2g/L，CaCl2 0.2g/L，NaCl 1g/L，NaH2PO4•2H2O0.31g/L，NaH2PO4 •2H2O 1.6g/L，玉米浆干粉 7.5g/L，pH 7.0，121℃灭菌15 min；所述的菌种为产琥珀酸放线杆菌（Actinobacillus succinogenes）NJ113。