利用DNA-AFLP快速准确鉴定酿酒大麦品种的方法

摘要

该发明是一种采用DNA-AFLP分子标记结合生物分析软件鉴定不同国内外酿酒大麦种质资源的方法。其特征为：1．建立了适于AFLP的植物基因组DNA提取方法和大麦种质分析的AFLP体系，选扩产物在6％变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳和银染。利用三对EcoRI/MseI引物组合（E8/M1、E8/M3、E8/M5）AFLP，构建了27种国内外酿酒大麦种质的AFLP指纹图谱。通过条带分析软件POPGEN、NTSYS3.0和STATISTICA/w5.0进行统计分析，根据电泳图谱利用10个特异性位点，27种材料都有自身独特的带型与其他品种互相区分，为进一步的麦芽生产及啤酒工艺打下了基础。

主权项

大麦DNA提取、AFLP扩增引物及扩增条件的确定：利用植物基因组试剂盒提取国内外啤酒生产大麦DNA纯度高，从64对Mse I和EcoR I引物不同组合中筛选了3对扩增引物E8/M1、E8/M3、E8/M5，进行预扩增、选择扩增，选扩产物（产物与变性剂比例为8：3）中加入8μL变性剂loading buffer（98%去离子甲酰胺，10mM EDTA，0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青），95℃变性5分钟，进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，经银染获得27种国内外不同的酿酒大麦品种的AFLP分子指纹图谱。