一种葡萄糖异构酶突变体及其应用

摘要

本发明公开了一种葡萄糖异构酶突变体及其应用，属于酶基因工程和酶工程领域。本发明由嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)总DNA获得高温葡萄糖异构酶基因(NCBI编码：CP000088)，经定点突变后，葡萄糖异构酶基因以质粒pT7-7或能表达该酶的载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)或能表达该酶的菌株为表达宿主，实现高转化率葡萄糖异构酶基因的高效表达；该葡萄糖异构酶基因全长个1158核苷酸，编码385个氨基酸，本发明构建了表达质粒，转化细菌或酵母表达葡萄糖异构酶，所获得的重组酶突变体具有葡萄糖异构酶活性，在70℃条件下转化率为60％，比亲本的转化率高出7％。该重组葡萄糖异构酶的最适温度为80℃，最适pH＝10，70℃半衰期不低于30h。此酶非常适合食品工业生产F55高果糖浆应用的需要。

主权项

一种葡萄糖异构酶突变体，其特征在于在NCBI登陆号YP_289661所示的氨基酸序列中进行一个氨基酸位点的取代，将第284位脯氨酸突变为丝氨酸。