九味镇心颗粒的检测方法

摘要

本发明公开了一种九味镇心颗粒的检测方法，本发明的检测方法对九味镇心颗粒中的酸枣仁、五味子、延胡索、肉桂、天冬、远志进行了薄层色谱和人参中的草酸钙进行了显微鉴别，以及人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的HPLC含量的测定方法。本发明的检测方法具有稳定、精密度良好、方法重现性较好、回收率高；良好分离效果的特点。通过本发明的方法可以进一步全面控制九味镇心颗粒的质量，并且本发明提供的测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量的方法可以实现人参皂苷Rg1和人参皂苷Re很好的基线分离效果，并且测定结果准确，重现性好。

主权项

一种九味镇心颗粒的检测方法，所述九味镇心颗粒的成分包括酸枣仁、五味子、延胡索、肉桂、天冬、远志、人参，其特征在于，所述方法检测包括：（1）对酸枣仁的鉴别方法包括：将所述九味镇心颗粒的样品研细，精密称定称取20g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100ml，密塞，称定重量，浸泡过夜，加热回流2小时，放冷，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液50ml，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚30ml振摇提取，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次35ml，合并氨试液，用水饱和的正丁醇35ml振摇提取，合并正丁醇溶液，用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液1；另取酸枣仁对照药材1g，加乙醚20ml，超声处理45分钟，滤过，弃去乙醚，药渣加甲醇30ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液1；再取酸枣仁皂苷A对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液1；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1、对照药材溶液1和对照品溶液1分别为5μl、8μl和2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4:1:5正丁醇‑甲酸‑水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，晾干，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（2）对五味子的鉴别方法包括：称取所述九味镇心颗粒的样品5g，研细，加三氯甲烷40ml，置于水浴上加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液2；另取五味子对照药材1g，与所述五味子的鉴别方法中所制成的供试品溶液2同法制成对照药材溶液2；再取五味子乙素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液2；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2、对照药材溶液2和对照品溶液2分别为4μl、4μl、4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为15:5:1石油醚‑甲酸乙酯‑甲酸的上层溶液为展开剂，所述石油醚的温度为30～60℃，展开，取出，晾干，置于紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（3）对延胡索的鉴别方法包括：称取所述九味镇心颗粒5g，研细，加浓氨试液1ml，三氯甲烷20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液3；另取延胡索对照药材1g，与所述延胡索的鉴别方法中所制成的供试品溶液3同法制成对照药材溶液3；再取延胡索乙素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液3；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液3、对照药材溶液3和对照品溶液3分别为20μl、5μl、2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为25:15:3:0.25正己烷‑三氯甲烷‑甲醇‑水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（4）对肉桂的鉴别方法包括：称取所述九味镇心颗粒15g，研细，加无水乙醇50ml，浸渍1小时，轻轻振摇。超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液4；另取肉桂对照药材1g，加无水乙醇20ml，与所述肉桂的鉴别方法中所制成的供试品溶液4同法制成对照药材溶液4；再取肉桂酸对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作 为对照品溶液4；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液4、对照药材溶液4和对照品溶液4分别为10μl、2μl、2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为43:8:1石油醚‑醋酸乙酯‑甲酸为展开剂，所述石油醚的温度为60～90℃，展开，取出，晾干，置于紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（5）对天冬的鉴别方法包括：称取所述九味镇心颗粒1g，研细，用5%盐酸的50%乙醇溶液浸泡过夜，水浴上回流水解3小时，放冷后，加5%氢氧化钠溶液中和至pH7.0，用20ml、20ml、20ml三氯甲烷分别提取3次，合并三氯甲烷液，挥干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液5；另取天冬对照药材1g，与所述天冬的鉴别方法中所制成的供试品溶液5同法制备成对照药材溶液5；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5、对照药材溶液5各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为8:3正己烷‑丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（6）对远志的鉴别方法包括：称取所述九味镇心颗粒3g，研细，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，滤液浓缩至约10ml，放冷，加入乙醚30ml，放置使沉淀完全，倾去上清液，沉淀挥干，加10%盐酸溶液10ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，沉淀物用甲醇5ml溶解，作为供试品溶液6；另取远志对照药材1g，与所述远志的鉴别方法中所制成的供试品溶液6同法制备成对照药材溶液6；按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液6和对照药材溶液6各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为8:4:0.2:0.5三氯甲烷‑丙酮‑正己烷‑醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%香 草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（7）对人参的鉴别方法包括显微鉴别和液相鉴别，显微鉴别如下：称取所述九味镇心颗粒，置于显微镜下观察；草酸钙簇晶20‑68um，梭角尖锐。