一种快速鉴定病原真菌的方法

摘要

本发明涉及一种病原真菌的快速鉴定方法，具体包括如下步骤：（1）固体培养基上培养真菌；（2）取新鲜真菌，利用微波法提取真菌DNA；（3）利用ITS1和ITS4引物PCR扩增真菌核糖体间区DNA片段；（4）PCR片段回收后序列测定；（5）利用NCBI的Blast对所得的序列进行比对。本发明可以在较为简单的实验条件下和较短的时间内进行未知病原真菌的鉴定，便于对田间发生的病害进行快速诊断，指导病害的防治。该方法经过对不同作物21种病原菌进行鉴定，经序列比对，符合率为100%。该方法不仅适用于新鲜菌丝的鉴定，也适用于一些病原真菌的分生孢子和菌核的鉴定，具有快速高效的特点。

主权项

一种快速鉴定病原真菌的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）培养待鉴定真菌，得到真菌菌丝体、菌核、或分生孢子；（2）取上述真菌菌丝体、菌核、或分生孢子置于缓冲液中，进行微波热振破壁处理后，置于冰上，离心后取上清液，即为真菌DNA提取液；（3）利用真菌通用引物ITS1和ITS4对上述真菌DNA提取液进行PCR扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，再利用PCR回收试剂盒回收纯化得到目的片段；（4）将上述目的片段直接进行序列分析，得到的核苷酸序列在NCBI网站利用blast搜索与之相匹配的真菌序列，匹配长度最长，序列一致性为100%的真菌判定为被鉴定真菌所属的真菌。