阳离子微泡及其制备方法

摘要

本发明公开了一种阳离子微泡，为脂类材料形成的微泡结构；所述脂类材料包括：作为主体材料的碳原子数为12～22的磷脂，占所述脂类材料的摩尔百分数的70％～90％；作为改性材料的疏水链段修饰的聚乙烯亚胺，占所述脂类材料的摩尔百分数的1％～20％；以及聚乙二醇修饰的所述碳原子数为12～22的磷脂，占所述脂类材料的摩尔百分数的1％～10％。这种阳离子微泡作为一种新型的基因转染试剂，将超声微泡和聚乙烯亚胺的优势结合起来的同时弥补其不足之处，具有超声造影剂微泡的优点，可以进行超声图像引导下的基因转染，同时可以用超声操控微泡进行定点的靶向转染。本发明还提供一种上述阳离子微泡的制备方法。

主权项

一种阳离子微泡的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、将碳原子数为12～22的磷脂、疏水链段修饰的聚乙烯亚胺以及聚乙二醇修饰的碳原子数为12～22的磷脂按照摩尔比例为70～90：1～20：1～10溶解在有机溶剂中并混匀；步骤二、用干燥的氮气流或惰性气体流除去有机溶剂，使得脂类混合物附着在容器壁上形成均匀的薄膜，之后干燥；步骤三、加入pH为7.2～7.6的缓冲液使得所述脂类混合物薄膜水化，接着将该脂类混合物加热至相变温度以上使其从容器壁上脱落，保持混合体系的温度不变超声振荡使得混合体系彻底分散至透明；步骤四、将透明的混合体系转移至密封容器中并保持所述密封容器内的溶液体积少于密封容器的容积的一半，将所述密封容器内的空气置换，接着对所述密封容器进行机械振荡，放置至少10min后得到阳离子微泡；步骤一中，所述疏水链段修饰的聚乙烯亚胺通过如下方法制得：按照摩尔比为1：1.2的比例将所述疏水链段对应的脂肪酸与N,N'‑羰基二咪唑分别溶解在有机溶剂中，在磁力搅拌下将疏水链段对应的脂肪酸的溶液逐滴加入到N,N'‑羰基二咪唑溶液中，氮气或惰性气体氛围下30℃反应24h，然后用饱和氯化钠溶液快速洗涤萃取，得到羧基活化的疏水链段对应的脂肪酸；按照摩尔比为1：1，将聚乙烯亚胺和所述羧基活化的疏水链段对应的脂肪酸分别溶解在有机溶剂中，在磁力搅拌下将羧基活化的疏水链段对应的脂肪酸溶液逐滴加入到聚乙烯亚胺溶液中，氮气或惰性气体氛围下30℃反应24h，然后乙醚沉淀纯化，得到疏水链段修饰的聚乙烯亚胺。