流行性感冒原代地鼠肾细胞多价疫苗的制备方法

摘要

本发明公开了一种制备流感疫苗的方法，包括步骤：a)将流感病毒原始毒种通过无特定病原鸡胚适应性传代，作为主代种子；b)原代地鼠肾细胞的制备及利用培养瓶或细胞生物反应器进行培养；c)用主代种子感染原代地鼠肾细胞，并进行适应性传代，直至得到病毒血凝效价不低于1∶640的毒种作为疫苗的工作种子；d)用工作种子感染原代地鼠肾细胞，进行病毒扩增，直至病毒血凝效价不低于1∶320为疫苗单价原液；e)疫苗单价原液经浓缩、灭活、纯化后，将不同型别的单价病毒液进行混合，分装成成品。原代地鼠肾细胞来源充足，易于大规模生产，制备的疫苗中不含对人或动物体具有致瘤性的可复制的DNA，安全性高。

主权项

一种流行性感冒疫苗，其特征在于，所述疫苗由如下方法制备，包括以下步骤：(a)将流行性感冒病毒原始毒种在无特定病原鸡胚进行1～3次适应性传代，病毒血凝效价达到1∶320以上的鸡胚尿囊液，作为主代种子；所述流行性感冒病毒原始毒种为甲1(H1N1)型IVR‑116、甲3(H3N2)型NYMC X‑15F或乙型B/Jiangsu/10/2003；(b)取10～14日龄的地鼠的原代肾细胞，利用培养瓶或细胞生物反应器进行培养；(c)用主代种子感染原代地鼠肾细胞，并进行适应性传代3～6代，直至得到病毒血凝效价不低于1∶640的毒种作为疫苗的工作种子；(d)用工作种子感染原代地鼠肾细胞，进行病毒扩增，直至病毒血凝效价不低于1∶320为疫苗单价原液；(e)疫苗单价原液经浓缩、灭活、纯化后，将不同型别的单价病毒液进行混合，分装成成品。