主权项 |
洒金珊瑚快速繁殖方法,其特征在于:按照以下步骤进行:步骤一,顶芽处理:挑选洒金珊瑚的顶芽,用小毛刷刷洗干净,自来水冲洗2~3h,用75%体积分数的酒精溶液浸泡2~3min,取出后用无菌水冲洗3~5次,再用0.1%质量分数的升汞溶液浸泡6~8min,取出后用无菌水冲洗5次,进行消毒灭菌处理;步骤二,启动诱导培养:剥除灭菌处理后的顶芽外部2‑3层鳞片叶,接种到启动诱导培养基中,培养基组分为MS+6‑BA 0.8~1.2mg/L +NAA0.1~0.15mg/L+蔗糖25~33g/L+琼脂6~9g/L,培养条件为:pH值5.7‑5.9,温度23~27℃,光照时间11~13h/d,光照强度2500Lux,启动诱导培养出无菌芽,培养时间20‑25d;步骤三,愈伤分化培养:将步骤二中获得的无菌芽的愈伤组织切成0.3~0.5cm的小块,接种到愈伤分化培养基上,培养基组分为MS+ TDZ 0.3~0.5mg/L + KT 0.3~0.6ml/L,进行愈伤分化培养得到丛生芽,培养条件同步骤二,培养时间20‑25d;步骤四,壮苗增殖培养:将丛生芽转入壮苗增殖培养基进行壮苗增殖培养,培养基组分构成和培养条件与启动诱导培养相同,培养得到不完全苗,培养时间25‑35d;步骤五,生根培养:将步骤四得到的壮苗转入生根培养基中,培养基组分为1/2MS+NAA0.2~0.4mg/L,进行生根培养,培养条件同步骤二,培养时间28‑32d,得到生根苗;步骤六,炼苗、移栽:将生根苗瓶口打开,使其与空气接触,保持湿度80~90%、温度20~22℃,炼苗时间3‑5d,然后用流水洗去生根苗基部的培养基,用0.1%质量分数的高锰酸钾溶液浸泡1~2 min后取出,移栽到消毒的栽培基质中培养,栽培基质为泥炭土:蛭石=2:1,培养得到再生植株。 |