发明名称 |
提取粪便中蛋白的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种提取粪便中蛋白的方法,包括以下步骤:取柱状粪便,将其分为三段,选择中段去皮,采集粪便样本装入特质盒中,置入冰中保存;然后将粪便样本转至-80℃冰箱中保存,待用;精确称取粪便样本置入离心管中,加入RIPA裂解液,用涡旋机涡旋样品,然后进行冰水浴,重复涡旋、冰水浴步骤,直至样品中无肉眼可见粪便颗粒;将涡旋液冰水浴后4℃离心,取上清液,将上清液再次离心,最终的上清液置于-80℃冰箱中保存。本发明方法每个步骤都包含了冰浴,减少了蛋白质降解的可能,同时也使蛋白充分解离,蛋白产量较高;本发明提取蛋白方法的重现性好、精密度高,而且离心时间较长,保证了蛋白的纯度,操作方便,较易控制。 |
申请公布号 |
CN103267669A |
申请公布日期 |
2013.08.28 |
申请号 |
CN201310189360.6 |
申请日期 |
2013.05.21 |
申请人 |
复旦大学附属上海市第五人民医院 |
发明人 |
蔡元坤;王会鹏 |
分类号 |
G01N1/42(2006.01)I |
主分类号 |
G01N1/42(2006.01)I |
代理机构 |
上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 |
代理人 |
曹翠娟 |
主权项 |
一种提取粪便中蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取柱状粪便,将其分为三段,选择中段去皮,采集粪便样本装入特质盒中,置入冰中保存;(2)然后将粪便样本转至-80℃冰箱中保存,待用;(3)精确称取粪便样本置入离心管中,加入RIPA裂解液,用涡旋机涡旋样品,然后进行冰水浴,重复涡旋、冰水浴步骤,直至样品中无肉眼可见粪便颗粒;(4)将涡旋液冰水浴后4℃离心,取上清液,将上清液再次离心,最终的上清液置于-80℃冰箱中保存。 |
地址 |
200240 上海市闵行区鹤庆路801号 |