一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌及其应用

摘要

本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBank，No.GenBank：AY345974.1，该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下，以廉价碳源葡萄糖为底物，调节酵母体内UDPG的代谢途径，全细胞催化St甙生成rebaudioside A。

主权项

一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌在生产莱鲍迪甙A中的应用，以诱导表达后的基因工程菌为全细胞催化剂，通过加入表面活性剂改变细胞的通透性，以甜菊甙和葡萄糖为底物，添加镁离子以及调节代谢物质，反应得到莱鲍迪甙A； 所述的产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBankNo.GenBank:AY345974.1，该基因序列命名为UGT； 所述的调节代谢物质为UMP、丁二酸、乳清酸或柠檬酸，UMP用量为0.5～3g/L，丁二酸用量为5～10g/L，乳清酸用量为1～5g/L，柠檬酸用量为10～20g/L。