| 摘要 |
1. Способ хроматографии по существу APF для получения комплекса биологически активного ботулинического нейротоксина типа А, включающий следующие последовательные этапы:(а) культивацию бактерий Clostridium botulinum в питательной среде (по существу APF);(б) ферментацию бактерий Clostridium botulinum из питательной среды в примерно от 2 до примерно 75 л среды ферментации по существу APF, при этом, по меньшей мере, одна питательная среда и среда ферментации включают белок растительного происхождения;(в) сбор среды ферментации путем удаления остатков клеток, присутствующих в среде ферментации;(г) концентрацию собранной среды ферментации путем фильтрации;(д) разведение концентрированной среды ферментации путем добавления буфера;(е) первый этап контакта, в ходе которого разведенная собранная среда ферментации контактирует с анионообменной средой, таким образом, биологически активный ботулинический нейротоксин улавливается анионообменной средой;(ж) элюирование уловленного ботулинического нейротоксина из анионообменной среды с получением первого элюента;(з) второй этап контакта, в ходе которого первый элюент контактирует с катионообменной средой для удаления примесей из первого элюента, в результате чего получают второй элюента;(и) обработку второго элюента диафильтрацией и(к) фильтрацию обработанного второго элюента с получением комплекса биологически активного ботулинического нейротоксина типа А с использованием способа хроматографии по существу APF, при этом полученный комплекс ботулинического нейротоксина типа А обладает активностью от 2,0·10до примерно 6,0·10единиц/мг комплекса ботулинического нейротоксина типа А.2. Способ по п. |
