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一种利用菌丝球作为生物载体固定化光合细菌的方法，其特征在于，该方法包括如下具体步骤：（1）将葡萄糖0.1~20克，蛋白胨0.1~20克，KH2PO4 0.1~10克，MgSO4·7H2O 0.01~10克加入到1000毫升蒸馏水中，用质量分数为10%的NaOH和10%的HCl调节pH 6~8，搅拌均匀，即为富集培养基；（2）配制100毫升富集培养基，倒入250毫升的锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌115℃，30分钟，取出锥形瓶冷却至室温，用接种环移取2环实验室冰箱保存的光合细菌至锥形瓶内，用无菌玻璃球将光合细菌打散、混匀，取出玻璃球，用黑布将锥形瓶周围包好，将锥形瓶置于空气浴振荡器中进行好氧黑暗培养，培养3天后备用，即得光合细菌种子液；其中，培养温度控制在25~35℃、空气浴振荡器转速控制在110~150 转/分钟；（3）用无菌水冲洗长有青霉菌孢子的斜面固体培养基的表面，并用接种环轻刮斜面，将冲洗后的含有青霉菌孢子的悬浮液用移液管移至锥形瓶中，添加无菌水使得每毫升悬浮液中含有青霉菌孢子106个，然后轻轻摇晃锥形瓶，使其中的孢子呈均匀分散状态，即得孢子悬液；（4）配制70~85毫升富集培养基，倒入250毫升的锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌115℃，30分钟，在冷却后的锥形瓶中按1：1～2的比例同时接种体积分数为5~10%的孢子悬液和体积分数为10~20%的光合细菌种子液，然后将锥形瓶置于温度25~35℃、转速110~160 转/分钟的空气浴振荡器中培养2~4天，即获得青霉菌与光合细菌形成的混合菌丝球；所述光合细菌是一株可降解2‑氯苯酚的沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris），16SrDNA序列为GenBank Accession No. HM068966。 |
